一名特工拉布拉多犬被招募到一个名为 T.U.F.F 的特遣部队中，并在他所居住的城市与不公正现象作斗争。
该片将以黄鼠狼巴克·怀尔德为主角，讲述巴克与负鼠兄弟Crash和Eddie的故事。
聚焦真人电影男主Larry Daley的儿子Nick Daley，他不情不愿地也成为了一名博物馆管理员，而《博物馆奇妙夜2》里的卡门拉法老又回来了，想要征服世界。
